類器官可能看起來像簡單的細(xì)胞團(tuán)塊，但它們正在改寫疾病建模的規(guī)則。在實驗室中，微小的3D人類細(xì)胞團(tuán)正在自我組織成類似于微型器官的結(jié)構(gòu)——揭示了組織發(fā)育、功能和衰竭的復(fù)雜性。歡迎來到類器官的世界：自我組織的3D細(xì)胞培養(yǎng)，它們正在重塑我們研究人類生物學(xué)和疾病的方式。

　　類器官不僅僅是2D培養(yǎng)的技術(shù)改進(jìn)——它們是一種范式轉(zhuǎn)變。它們既提供了體內(nèi)模型的結(jié)構(gòu)復(fù)雜性，又保留了體外實驗的可及性。對于研究阿爾茨海默病背后機(jī)制、測試結(jié)直腸癌藥物反應(yīng)或模擬病毒感染影響的研究人員來說，類器官提供了一個特別的窗口來觀察生命系統(tǒng)，而無需離開實驗室工作臺。

　　是什么讓類器官如此特別？

　　類器官最重要的貢獻(xiàn)之一是它們能夠作為更準(zhǔn)確的疾病模型。通過密切模擬人類組織的細(xì)胞復(fù)雜性和功能，類器官彌合了簡化的體外模型和復(fù)雜的體內(nèi)系統(tǒng)之間長期存在的差距。傳統(tǒng)的2D培養(yǎng)通常無法捕捉組織的三維組織，而動物模型在代表人類特異性反應(yīng)方面可能存在不足。然而，類器官提供了一個折中方案——既具有體外系統(tǒng)的可擴(kuò)展性，又具有更接近人體器官的生理相關(guān)性。

　　類器官真正令人興奮的地方在于它們能夠自我組織成不僅反映真實組織的結(jié)構(gòu)，而且反映其發(fā)育動態(tài)的結(jié)構(gòu)。這不僅僅是模仿外觀——它們還表現(xiàn)出行為和反應(yīng)，為我們了解人類器官如何形成、適應(yīng)或功能障礙提供了一個窗口。它們在具有多因素原因和復(fù)雜組織相互作用的疾病中具有重要意義。

　　類器官可以源自多種細(xì)胞來源，包括患者特異性干細(xì)胞、成人組織干細(xì)胞，甚至腫瘤活檢。這種多功能性既可以實現(xiàn)個性化的疾病建模，也可以實現(xiàn)對發(fā)育和病理的標(biāo)準(zhǔn)化研究。

圖1|類器官與其他模型系統(tǒng)的比較。改編自Sun, X, et al,2023 

　　類器官的應(yīng)用：

　　類器官比傳統(tǒng)模型提供更高的臨床保真度，并且具有成本效益和效率，從而能夠更準(zhǔn)確地進(jìn)行疾病模擬和快速的藥物功能測試。目前，類器官主要用于四個關(guān)鍵領(lǐng)域：

　　1.疾病建模

　　類器官已成為研究器官發(fā)育和疾病機(jī)制的有力工具，其環(huán)境與人類生理非常相似。它們源自患者組織或多能干細(xì)胞，保留了原生的遺傳和功能特征，因此非常適合研究從神經(jīng)發(fā)育和傳染病到代謝紊亂和癌癥的廣泛疾病。

　　在癌癥研究中，腫瘤來源的類器官保留了原始腫瘤的遺傳異質(zhì)性和結(jié)構(gòu)，包括與基質(zhì)細(xì)胞和免疫細(xì)胞的相互作用。這使得研究人員能夠以患者特異性的方式探索腫瘤進(jìn)展、侵襲和耐藥性的機(jī)制。類器官已被證明在重現(xiàn)復(fù)雜的腫瘤微環(huán)境方面特別有用，并且現(xiàn)在被用于實時預(yù)測治療反應(yīng)。

　　在神經(jīng)系統(tǒng)疾病領(lǐng)域，大腦類器官能夠研究人類大腦發(fā)育、突觸形成和神經(jīng)炎癥——這些過程在動物中難以建模。它們提供了對諸如阿爾茨海默病、自閉癥譜系障礙、癲癇和小頭畸形等疾病的見解。 值得注意的是，大腦類器官可以重現(xiàn)諸如tau聚集和淀粉樣斑塊發(fā)育等特征，從而為研究神經(jīng)退行性疾病和測試靶向療法提供了一個生理相關(guān)的平臺。

　　它們具有模擬早期疾病過程、組織特異性病理和患者變異性的能力，這使得類器官對于發(fā)現(xiàn)疾病機(jī)制、識別新的治療靶點以及在與人類相關(guān)的條件下驗證實驗性干預(yù)措施具有不可估量的價值。

圖2|類器官的四個主要應(yīng)用。改編自Sun, X, et al,2023

　　2.藥物發(fā)現(xiàn)赫毒性篩選

　　制藥行業(yè)面臨著巨大的壓力，需要在降低開發(fā)成本的同時，找到安全有效的藥物。類器官通過提供可擴(kuò)展的、高通量的平臺來模擬真實組織反應(yīng)，從而提供了一種解決方案。研究人員現(xiàn)在可以在患者來源的類器官模型中篩選數(shù)百種化合物，以評估治療潛力和毒性。例如，肝臟和腎臟類器官被用于檢測脫靶效應(yīng)，而腫瘤類器官被用于預(yù)測對化療或靶向藥物的反應(yīng)。將這些分析與微流控和人工智能驅(qū)動的成像分析相結(jié)合，可進(jìn)一步提高通量和精確度。

　　3.再生醫(yī)學(xué)

　　類器官不僅僅是模型——它們是組織替代的藍(lán)圖。它們在再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用包括重建受損組織、支持器官修復(fù)以及潛在地作為可移植的構(gòu)建塊。生物打印、支架工程以及與免疫或血管細(xì)胞共培養(yǎng)系統(tǒng)的進(jìn)步已經(jīng)突破了可能的界限。雖然臨床應(yīng)用仍處于早期階段，但來自腸道、視網(wǎng)膜和肝臟組織的類器官已在臨床前模型中顯示出恢復(fù)喪失的功能和逆轉(zhuǎn)退化的前景。

　　4.個性化醫(yī)療

　　類器官具有變革性的應(yīng)用之一是為個體患者量身定制治療方案。通過培養(yǎng)來自患者來源組織的類器官，臨床醫(yī)生可以在給藥前在體外測試藥物療效和耐藥性。這種方法已經(jīng)在結(jié)直腸癌、乳腺癌和胰腺癌等癌癥中顯示出臨床價值，其中腫瘤異質(zhì)性通常導(dǎo)致不同的治療結(jié)果。例如，在囊性纖維化中，當(dāng)僅靠遺傳學(xué)不足以指導(dǎo)治療決策時，基于類器官的分析已指導(dǎo)了治療決策。為了說明這種方法的影響，讓我們看一個真實的例子：

　　案例研究：囊性纖維化和個性化藥物測試

　　類器官應(yīng)用的一個引人注目的真實案例可以在囊性纖維化(CF)研究中找到?？茖W(xué)家們從患者干細(xì)胞中培育出腸道類器官，并利用功能性膨脹分析來評估CFTR調(diào)節(jié)藥物的有效性。這些類器官會因離子和水的流入而膨脹，從而對有效治療做出反應(yīng)——這是藥物起效的直接視覺提示。

　　這種分析使臨床醫(yī)生能夠預(yù)測具有罕見或知之甚少的CFTR突變的個體的藥物反應(yīng)。在許多病例中，它為個性化治療提供了指導(dǎo)，而在這些病例中，僅靠基因檢測并不能提供明確的治療方案。該模型說明了類器官在藥物測試中的強(qiáng)大作用，并展示了其在精準(zhǔn)醫(yī)療中的臨床實用性。

圖3|評估患者來源的類器官中的CFTR功能

　　賦能技術(shù)：智能平臺的作用

　　類器官研究在很大程度上依賴于支持性技術(shù)，就像依賴于細(xì)胞本身一樣?，F(xiàn)代平臺能夠?qū)崿F(xiàn)精確的凝膠處理、長期灌注和先進(jìn)的成像——所有這些對于可重復(fù)且生理相關(guān)的實驗至關(guān)重要。

　　像 µ-Slide Spheroid Perfusion 這樣的微流控工具提供可控的流動來模擬體內(nèi)條件，支持對生長、藥物反應(yīng)和組織結(jié)構(gòu)的實時研究。

　　ibidi 的 µ-Patterning 技術(shù)可利用帶有圖案點的非粘性表面實現(xiàn)空間定義的細(xì)胞粘附。這種設(shè)置非常適合生成均勻的球體、研究細(xì)胞行為或使用高分辨率成像進(jìn)行CAR-T細(xì)胞殺傷測定。

　　最后，µ-Plate 96 Well 3D 將高通量能力與最小的凝膠使用量和光學(xué)質(zhì)量相結(jié)合——使其成為以標(biāo)準(zhǔn)化、高效的方式進(jìn)行篩選、3D細(xì)胞培養(yǎng)和實時成像的理想選擇。

　　超越單一類器官：組裝類器官系統(tǒng)

　　雖然傳統(tǒng)的類器官提供了對單個器官行為的見解，但許多人類疾病涉及多個組織之間的串?dāng)_。這導(dǎo)致了多器官類器官系統(tǒng)(也稱為組裝類器官)的出現(xiàn)，該系統(tǒng)結(jié)合了不同的類器官——例如大腦-脊髓或腸道-肝臟——以更好地復(fù)制生理相互作用。這些模型越來越多地用于在單個平臺上研究發(fā)育、全身藥物效應(yīng)、激素信號傳導(dǎo)和免疫-器官通訊。它們的復(fù)雜性為模擬跨越多個器官系統(tǒng)的疾病和構(gòu)建更全面的芯片上身體平臺開辟了新的可能性。

　　最近的一個例子涉及一個心腎單元，其中來自hiPSC的心臟和腎臟類器官在微流控芯片上組合在一起[10]。使用 µ-Slide III 3D 灌注，研究人員在靜態(tài)和流動條件下保持了兩種類器官的結(jié)構(gòu)和功能完整性。該系統(tǒng)證明了灌注下類器官共培養(yǎng)如何能夠支持未來對器官間信號傳導(dǎo)和疾病機(jī)制的研究——使該領(lǐng)域更接近集成的器官水平建模。

圖4|用于研究器官間串?dāng)_的雙類器官系統(tǒng)

　　結(jié)論

　　隨著科學(xué)不斷突破我們可以在人體外復(fù)制的界限，類器官正處于創(chuàng)新的前沿。這些微小的、類似器官的細(xì)胞團(tuán)正在幫助科學(xué)家完成從疾病建模到新藥測試的所有工作，而這一切都離不開實驗室。

　　隨著我們不斷改進(jìn)這些模型并開始將AI、組學(xué)和生物工程融入其中，我們正朝著一個個性化的、器官水平的洞察力從實驗室到臨床床邊塑造醫(yī)學(xué)的未來邁進(jìn)。

　　要了解更多關(guān)于球狀體、類器官和3D細(xì)胞培養(yǎng)的信息，可查看（ibidi雷萌）公眾號中的3D細(xì)胞培養(yǎng)合集，或聯(lián)系我們索要3D細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用指南。